Esta parte de la norma ISO 16649, desarrollada por la Organización Internacional de Normalización (ISO), Este documento prevé la detección de la enzima β-glucuronidasa mediante la técnica de recuento de colonias después de la incubación a 44 °C en un medio sólido que contiene un componente cromogénico y reanimación con membranas indica un método horizontal para la enumeración positiva de Escherichia coli.
Se aplica a productos para consumo humano, productos para nutrición animal, muestras ambientales en la producción y procesamiento de alimentos, y muestras de la etapa de producción primaria, como excremento animal, polvo e hisopos.
Bacterias Escherichia coli β-glucuronidasa positivas que forman colonias típicas de color azul o azul verdoso a 44 °C en agar triptona-bilis X-glucurónido (TBX) en las condiciones especificadas en este documento.
Recuento de Escherichia coli β-glucuronidasa positiva, determinación del número de unidades formadoras de colonias (ufc) de Escherichia coli β-glucuronidasa positiva por gramo de muestra, por mililitro, por centímetro cuadrado o por dispositivo de muestreo cuando se realiza el análisis según este documento.
Se inocula una cantidad específica de la muestra de prueba, suspensión inicial o diluciones decimales, en membranas colocadas en agar glutamato modificado con minerales (MMGA), seguido de incubación a 37 °C durante 4 horas.
Para el aislamiento, las membranas del paso de reanimación en el MMGA se transfieren a agar X-glucurónido triptonebilizado (TBX), seguido de incubación a 44 °C durante 20 a 24 horas.
El número de unidades formadoras de colonias (ufc) de Escherichia coli β-glucuronidasa positiva por gramo o mililitro de muestra se calcula a partir del número de colonias típicas azules o azul verdosas por placa.
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