Detección simultánea de coliformes totales y E. Coli con el procedimiento de filtro de membrana de doble cromógeno SM 9222H

Con respecto a la técnica de MF, el grupo de coliformes se define como bacterias anaerobias facultativas, gramnegativas, no formadoras de esporas, con forma de bastón, que desarrollan colonias con características distintivas en medios específicos. En raras ocasiones, en el medio m-Endo, los organismos no coliformes pueden producir colonias brillantes típicas, y las colonias atípicas (colonias con núcleos rosados, carmesí o no luminosos) pueden ser bacterias coliformes; por lo tanto, se recomienda la confirmación de todas las colonias típicas y atípicas.

La técnica MF se puede utilizar para probar aguas potables, superficiales, subterráneas, de piscinas y de mar. Solo a menos que la muestra esté diluida, ya que un alto nivel de turbidez puede obstruir rápidamente el filtro de membrana antes de que se recopile suficiente muestra.
La técnica MF no se utiliza para analizar aguas residuales tratadas con tratamiento primario.

El aparato de prueba SM 9222H se prueba con cada lote de controles de cultivo positivos y negativos antes de su uso. Se filtran de 20 a 30 ml de agua de dilución o enjuague a través del filtro para verificar la contaminación por coliformes al principio y al final de cada serie de filtración. Si los controles muestran contaminación, todos los datos de las muestras afectadas
rechazadas y se solicitan nuevas muestras.

Para contar las colonias en los filtros de membrana, se utiliza un microscopio binocular de disección de campo amplio de baja potencia (10 a 15 ) u otro dispositivo óptico con una fuente de luz fluorescente blanca fría orientada para proporcionar imágenes óptimas. Bajo luz ambiental normal, todas las colonias de color rojo y azul a púrpura se cuentan y registran como el resultado de coliformes totales. Solo las colonias azules a moradas se cuentan y registran como resultado de E. coli. Las colonias claras o blancas son aceptables.

Verificación de coliformes: No se requiere verificación de coliformes totales y colonias para el agua potable. Para aguas distintas al agua potable, la verificación debe hacerse con la frecuencia que determine el laboratorio. Según la necesidad y el tipo de muestra, los laboratorios pueden adoptar medidas de control de calidad más estrictas (por ejemplo, se debe confirmar el 10 % de las muestras positivas si se confirma al menos una colonia de cada tipo de colonia típica o atípica de un cultivo de filtro de membrana en particular). Su número debe ajustarse de acuerdo con los resultados de la validación.

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