La cromatografía líquida es una técnica que se utiliza para separar una muestra en sus partes individuales. Esta separación tiene lugar en base a las interacciones químicas o físicas de la muestra con las fases móvil y estacionaria.
Debido a que existen muchas combinaciones de fases estacionarias y móviles que se pueden usar al separar una mezcla, existen varios tipos diferentes de cromatografía clasificados según los estados físicos de estas fases. La cromatografía en columna líquido-sólido, la técnica de cromatografía más popular, tiene una fase móvil líquida que trae consigo componentes que se filtran lentamente fuera de la fase estacionaria sólida.
Se basa en bombas para hacer pasar un disolvente líquido presurizado que contiene la mezcla de muestra a través de una columna llena de un material adsorbente sólido. Cada componente de la muestra interactúa de manera ligeramente diferente con el material adsorbente, lo que genera velocidades de transporte diferentes para los diferentes componentes y hace que los componentes se separen a medida que fluyen fuera de la columna.
Cromatografía líquida de alta resolución
Se encuentran disponibles muchas técnicas y sistemas de cromatografía diferentes para una amplia variedad de aplicaciones, definidas como cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
El análisis por HPLC se centra en el aislamiento de macromoléculas mediante interacción química, afinidad o volumen hidrodinámico. Las columnas de cromatografía SEC-HPLC funcionan mediante la interacción física con el medio poroso; esta es una diferencia notable entre SEC y muchas otras técnicas de cromatografía líquida. La interacción química de la muestra con la columna no es necesaria ni deseable, ya que la separación debe basarse únicamente en el tamaño molecular (en relación con el radio de Stokes de una partícula). SEC se utiliza principalmente para el análisis de moléculas grandes como proteínas, polímeros y polisacáridos.
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