Esta parte de la norma ISO 11348 desarrollada por la Organización Internacional de Normalización (ISO) describe tres métodos para determinar la inhibición de la luminiscencia emitida por la bacteria marina Vibrio fischeri (NRRL B-11177). ISO 11348-3 especifica un método que utiliza bacterias liofilizadas.
Este método se aplica a:
Las personas que utilicen esta parte de la Norma ISO 11348 deben estar familiarizadas con las prácticas normales de laboratorio. Esta norma no pretende abordar todos los problemas de seguridad, si los hubiere, asociados con su uso. Es responsabilidad del usuario establecer prácticas adecuadas de seguridad y salud y garantizar el cumplimiento de los requisitos reglamentarios nacionales.
Las mediciones especificadas en la norma ISO 11348 se pueden realizar con bacterias recién preparadas, así como con preparaciones bacterianas liofilizadas o líquidas. Los estudios estandarizados de DIN Normenausschuss Wasserwesen e ISO/TC 147/SC 5/WG 1 muestran que, en casos especiales, estas diferentes técnicas pueden producir resultados diferentes, especialmente en presencia de metales pesados.
ha mostrado.
Esta sensibilidad variable se debe a las diferencias en la composición de los medios utilizados en la preparación de bacterias liofilizadas o secadas en líquido. Estos entornos protectores pueden afectar la biodisponibilidad de sustancias tóxicas y/o
afectar la emisión de luz de las bacterias luminiscentes. Esto significa que se debe considerar el origen y el tipo de preparación al interpretar los resultados. Bacterias liofilizadas y liofilizadas de diferentes proveedores
Esto puede ser difícil a veces. Esto puede significar que la composición no se conoce en detalle y por lo tanto no puede ser interpretada por el usuario.
Por lo tanto, además de las mediciones de toxicidad con bacterias secas líquidas (ISO 11348-2) y bacterias recién preparadas (ISO 11348-1), esta sección de la Norma ISO 11348 describe un procedimiento con bacterias liofilizadas. Puede ser interpretado en cada detalle por el usuario. Los laboratorios responsables de los resultados tienen la oportunidad de elegir la técnica más adecuada en función de su opinión experta y conocimiento de la muestra de agua a analizar.
La inhibición de la emisión de luz por cultivos de Vibrio fischeri se determina mediante una prueba por lotes. Esto se logra combinando ciertos volúmenes de la muestra de prueba o muestra diluida con una suspensión bacteriana luminiscente en un tubo de ensayo.
El criterio de ensayo es la luminiscencia, medida tras un tiempo de contacto de 15 minutos o 30 minutos y opcionalmente 5 minutos, teniendo en cuenta un factor de corrección (fkt), que es una medida de los cambios de intensidad de las muestras de control a lo largo del tiempo de exposición. El efecto inhibitorio de la muestra de agua se puede determinar mediante una serie de diluciones como LID (ver Anexo B) o valores EC20 y/o EC50.
Las sustancias insolubles, poco solubles o volátiles o las sustancias que reaccionan con el agua de dilución o la suspensión o cambian de estado durante el período de prueba pueden afectar el resultado o perjudicar la reproducibilidad de los resultados de la prueba.
En aguas fuertemente coloreadas o turbias, pueden ocurrir pérdidas de luminiscencia por absorción de luz o dispersión de luz. Esta interferencia se puede compensar mediante un tratamiento de la muestra para la turbidez o, por ejemplo, mediante el uso de un tubo de ensayo de corrección de absorción de doble cámara.
Dado que se requiere oxígeno para la bioluminiscencia, las muestras con una demanda alta de oxígeno (y/o una concentración baja de oxígeno) pueden causar deficiencia de oxígeno y ser inhibitorias. Los nutrientes fácilmente biodegradables en la muestra pueden causar una reducción de la bioluminiscencia independiente del contaminante.
Entre los servicios prestados por nuestra organización en el marco de los servicios de ensayo de materiales, también se encuentran los ensayos estándar ISO 11348-3. No dude en ponerse en contacto con nuestro laboratorio EUROLAB para sus solicitudes de prueba y certificación.
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