(HP-SEC) Visoko zmogljivi testi izključitvene kromatografije

Izključitvena kromatografija visoke ločljivosti (HP-SEC) je dobro uveljavljena, robustna in vsestranska tehnika za karakterizacijo in preiskavo proteinskih monomerov, fragmentov in agregatov.

Pri tej preskusni metodi se vzorec vbrizga v kolono, ki se nenehno izpira z mobilno fazo. Kromatografska kolona vsebuje fine in porozne kroglice dekstrana, agaroze, silicijevega dioksida ali poliakrilamida (stacionarna faza). Kroglice omogočajo majhnim vrstam, da migrirajo v pore, kar poveča njihovo zadrževanje v stolpcu, medtem ko večje vrste migrirajo z mobilno fazo, ne da bi vstopile v pore kroglic. Tako večje vrste dosežejo konec stebra hitreje kot manjše vrste.

Po ločitvi se različne vrste zaznajo z detektorji, ki vključujejo: ultravijolično absorpcijo, fluorescenco, lomni količnik, večkotno sipanje laserske svetlobe in detekcijo nabitega aerosola.

Tehnika HP-SEC omogoča določanje velikosti, kvantifikacijo in določanje molekulske mase fragmentov, monomerov in agregatov. Razpon velikosti te tehnike je določen z velikostjo por kolone in nastavitvijo metode, npr. mobilno fazo, nastavitvami pretoka in dimenzijami kolone.

Za običajne vrste vzorcev v naprednih laboratorijih se standardizirane metode pogosto uporabljajo z malo truda pri nastavitvi. Poleg tega izkušeni analitiki razvijajo metode v skladu z učinkovinami, vrsto izdelka in stopnjo razvoja.

Na kratko, kromatografija za izključitev velikosti je tehnika, ki se uporablja za ločevanje beljakovin in drugih bioloških makromolekul na podlagi velikosti molekul. Danes je ta tehnika, ki ločuje molekule po velikosti s filtracijo skozi gel, postala široko sprejeta in se pogosto uporablja zaradi različnih molekulskih mas beljakovin v bioloških tkivih in izvlečkih. Velikostno izključitvena kromatografija se uporablja tudi za številne namene, vključno z izmenjavo pufra (razsoljevanje), odstranjevanjem neproteinskih kontaminantov (DNA, virusi), odstranjevanjem beljakovinskih agregatov, preučevanjem bioloških interakcij in zvijanjem beljakovin (razsoljevanje). Združljivost s fiziološkimi pogoji prav tako ustvarja pomembno prednost.

Naša organizacija nudi tudi (HP-SEC) visoko zmogljive storitve testiranja z izključitveno kromatografijo s svojim usposobljenim in strokovnim osebjem ter napredno tehnološko opremo, med številnimi študijami testiranja, meritev, analiz in ocenjevanja, ki jih zagotavlja podjetjem v različnih sektorjih.