OECD TG 408 Kemirgenlerde Tekrarlanan Doz 90 Günlük Oral Toksisite Çalışması

OECD çok uluslu şirketler için sorumlu iş davranışına ilişkin kılavuz ilkeleri (OECD kılavuzları), hükümetlerin çok uluslu şirketlere işlerini sürdürülebilir ve sorumlu bir şekilde nasıl yapacaklarına ilişkin tavsiyeler içermektedir.

Bu çerçevede hazırlanan “OECD TG 408 Kemirgenlerde tekrarlanan doz 90 günlük oral toksisite çalışması” kılavuzu, oral uygulama yoluyla test maddesine maruz kalma sonucu ortaya çıkabilecek sağlık tehlikesine yönelik genel bilgi sağlamak amacı ile tasarlanmıştır.

Tekrarlanan dozlar kullanılarak subkronik oral toksisitenin belirlenmesi, akut veya 28 günlük tekrarlanan doz toksisite testlerinden toksisiteye ilişkin ilk bilgilerin elde edilmesinden sonra gerçekleştirilebilir. Bu yöntem, ilgili maddenin uzun bir süre boyunca (genelde 90 gün boyunca günde bir doz seviyesi) tekrarlanan oral uygulamasına dayanmaktadır.

Bu test yönteminin öncelikle kemirgenlerle (tercihen sıçan) kullanılması amaçlanmıştır. Her test grubu için en az 20 hayvan (10 dişi ve 10 erkek) kullanılır. En az üç konsantrasyon kullanılır. Test bileşiği sondayla veya diyet veya içme suyu yoluyla uygulanır. 1000 mg/kg vücut ağırlığı/gün dozunda herhangi bir etki beklenmiyorsa bir sınır testi yapılabilir.

Bu çalışmanın sonuçları şunları içerir:

• Ölçümler (en az haftada bir kez tartım, yiyecek ve su tüketimi)
• Her gün tercihen aynı saatte günlük ve ayrıntılı gözlemler (oftalmolojik muayene, hematoloji, klinik biyokimya ve idrar tahlili)
• Bunların yanı sıra brüt otopsi ve histopatoloji

Bu kılavuzun son yapılan güncellemesinde özellikle tiroid fonksiyonu ile ilgili bir dizi endokrin ölçümü eklenmiştir. Uygun şekilde yürütülen 90 günlük bir subkronik test, etkisizlik konusunda tatmin edici bir tahmin sağlar. Subkronik sistemik toksisite, kimyasal maddeler, famasötikler ve benzer maddelerin tekrarlı olarak uygulanması sonucu 90 gün boyunca klinik takibi sonucunda oluşabilecek klinik bulgular ve daha sonrasında ölüm sonrası (nekropsi, histopatoloji, hematoloji ve biyokimyasal parametreler) değerlendirmeleri dikkate alarak belirlenir.

Prensip olarak test kimyasalı, en az 90 günlük bir süre boyunca grup başına bir doz seviyesi olacak şekilde çeşitli test hayvanı gruplarına kademeli dozlarda günlük olarak oral yoldan uygulanır. Uygulama süresi boyunca hayvanlar, toksisite belirtileri açısından yakından gözlemlenir. Test sırasında ölen veya insani bir şekilde öldürülen hayvanlara otopsi yapılır ve testin sonunda geri kalan hayvanlara da tam dozlama periyodundan sonra insani bir şekilde öldürülür ve nekropsi yapılır.

Testler için tercih edilen tür sıçandır, ancak diğer kemirgen türleri de örneğin fare kullanılabilir. Bu kılavuz kapsamında belirtilen parametreler başka bir kemirgen türünde araştırılıyorsa, parametre ölçümüne yapılan uyarlamalar dahil olmak üzere türün seçimine ilişkin ayrıntılı bir gerekçe verilmelidir. Diğer türlerin toksik maddelere sıçanlara benzer şekilde tepki vermesi biyolojik olarak makul olsa da daha küçük türlerin kullanılması, daha küçük organların kesilmesindeki teknik zorluklar nedeniyle son nokta ölçümlerinde değişkenliğin artmasına neden olabilir.

Testler yapılırken, genç sağlıklı yetişkin hayvanların yaygın olarak kullanılan laboratuvar suşları kullanılır. Dişiler doğum yapmamış ve hamile kalmamış olmalıdır. Dozlamaya sütten kesimden sonra mümkün olan en kısa sürede ve her durumda hayvanlar dokuz haftalık olmadan önce başlanır. Çalışmanın başlangıcında, kullanılan hayvanların ağırlık değişimi minimum düzeyde olmalı ve her cinsiyetin ortalama ağırlığının artı/eksi yüzde 20’sini aşmamalıdır. Çalışmanın uzun vadeli bir kronik toksisite çalışmasının ön hazırlıkları olarak yürütüldüğü durumlarda, her iki çalışmada da aynı suş ve kaynaktan hayvanlar kullanılır.

Kuruluşumuz, çeşitli sektörlerdeki işletmeler için verdiği sayısız test, ölçüm, analiz ve değerlendirme çalışmaları arasında, eğitimli ve uzman bir kadro ve gelişmiş teknolojik donanımı ile “OECD TG 408 Kemirgenlerde tekrarlanan doz 90 günlük oral toksisite çalışması” kılavuzunda tanımlanan test hizmetleri de vermektedir.