In Vitro Sitotoksisite Testleri

In vitro sitotoksisite testi, hücre ölümünü, hücre büyümesinin inhibisyonunu, koloni oluşumunu ve tıbbi cihazlar, materyaller veya bunların ekstraktlarının hücreler üzerinde neden olduğu diğer etkileri belirlemek için kullanılan, hücre kültürü tekniklerini kullanan bir test yöntemidir.

Tıbbi cihazların biyolojik değerlendirme sisteminde in vitro sitotoksisite testi en önemli test göstergelerinden biridir. Sitotoksisite testi yoluyla tıbbi cihazların ve biyomateryallerin potansiyel in vitro sitotoksisitesi değerlendirilebilir. Canlı organizmaların dokularında ve hücrelerinde kullanılmadan önce in vitro sitotoksisite testi, reaksiyon etkilerini tespit etmek için simüle edilmiş bir test görevi görür.

In vitro sitotoksisite test yöntemleri ekonomiktir, basittir ve aynı anda toplu testler için kullanılabilir. Numunelerin hayvan laboratuvar testlerine tabi tutulup tutulmaması konusunda önemli tarama materyalleri sağlar.

Gelişmiş laboratuvarlar, sitotoksisite testlerinde uzun yıllara dayanan deneyime sahiptir ve tıbbi cihazların ve biyomateryallerin sitotoksisite testleri için mükemmel bir test sistemine sahiptir. Tıbbi cihazların ve biyomateryallerin sitotoksisite testleri için test yöntemleri genel olarak iki kategoriye ayrılır: sitotoksisite niceliksel testi ve sitotoksisite niteliksel testi.

Sitotoksisite kantitatif testi (MTT testi), hücre metabolik aktivitesinin gözlemlenmesine dayanmaktadır. MTT testi, hücre metabolik aktivitesini değerlendirmek için kolorimetrik bir yöntemdir. Bu test, canlı hücreler tarafından mavi-mor bir formazan oluşturmak üzere indirgenen, sarı, suda çözünebilen bir reaktiftir. Formazanın izopropanol içinde çözülmesinden sonra optik yoğunluk, bir spektrofotometre kullanılarak ölçülür ve canlı hücrelerin sayısı, optik yoğunlukla orantılıdır. Bu testlerde “ISO 10993-5 Tıbbi cihazların biyolojik değerlendirmesi - Bölüm 5: In vitro sitotoksisite testleri” ve “ISO 10993-12 Tıbbi cihazların biyolojik değerlendirmesi - Bölüm 12: Numune hazırlama ve referans malzemeleri” standartları esas alınır.

Sitotoksisite kalitatif testinde (ISO kalitatif yöntem), tıbbi cihaz sızıntı suları hücrelerle kültürlenir ve hücrelerin biyolojik tepkisi mikroskop altında gözlemlenir. Hücrelerdeki değişiklikler, hücre morfolojisi, vakuol oluşumu, hücre ayrılması, hücre lizizi ve hücre zarı bütünlüğü gibi yönlerden değerlendirilir ve buna göre derecelendirilir. Bu testlerde “ISO 10993-5 Tıbbi cihazların biyolojik değerlendirmesi - Bölüm 5: In vitro sitotoksisite testleri” standardı esas alınır.

Bir başka sitotoksisite kalitatif test yöntemi (USP kalitatif yöntem), ekstraktın biyolojik tepkisini belirlemek için hastalarla doğrudan veya dolaylı temas halinde olan elastomerik veya polimerik malzemelerden sızıntı sularının hücre morfolojisi üzerindeki etkisini değerlendirir.

Kısaca sitotoksisite testi, tıbbi cihazlarla hücre büyümesini, çoğalmasını ve morfolojik etkilerini gözlemlemek amacıyla doku hücrelerini in vitro kullanan biyolojik değerlendirme ve tarama testlerinden biridir. Sitotoksisite, basit, hızlı, yüksek hassasiyete sahip olması ve hayvanları toksisiteden kurtarabilmesi nedeniyle tıbbi cihazların toksisite değerlendirmesinde önemli bir gösterge olarak tercih edilmektedir.

Uluslararası Standardizasyon Örgütü, ISO 109993-5 standardında üç tür sitotoksisite testi tanımlamaktadır: Ekstrakt, doğrudan temas ve dolaylı temas testleri. Gerçek zamanlı hücre analiz sistemi son yıllarda sitotoksisite açısından önemli bir potansiyel göstermektedir.

Tıbbi cihazlar çeşitli klinik disiplinlerde yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu cihazlar vücudun doku ve hücreleriyle doğrudan temasta olduğundan, sadece iyi fiziksel ve kimyasal özelliklere sahip olmayı değil, aynı zamanda iyi bir biyouyumluluğa da sahip olmaları gerekir. Biyouyumluluk testleri arasında sitotoksisite, basit, hızlı, duyarlılığı yüksek ve hayvanları toksisiteden kurtarabilmesi nedeniyle pilot proje testi olarak ve tıbbi cihazların değerlendirilmesinde önemli bir gösterge olarak tercih edilmektedir.

Kuruluşumuz, çeşitli sektörlerdeki işletmeler için verdiği sayısız test, ölçüm, analiz ve değerlendirme çalışmaları arasında, eğitimli ve uzman bir kadro ve gelişmiş teknolojik donanımı ile in vitro sitotoksisite testleri hizmetleri de vermektedir.